Оценка иммунного статуса человека в условиях воздействия химического и биологического фактора - Мартынов А.И.

Год выпуска: 2011

Автор: Мартынов А.И., Пинегин Б.В., Ярилин А.А.

Жанр: Иммунология

Формат: PDF

Качество: OCR

Описание: Цель пособия — создание комплекса стандартных и унифицированных тестов оценки иммунного статуса человека для изучения влияния на иммунитет различных химических и биологических факторов антропогенной природы. В первой главе представлена методология иммунологического мониторинга и иммуноэпидемиологических обследований экологически неблагоприятных регионов Российской Федерации и стран СНГ, разработанная коллективом ФГБУ «ГНЦ Институт иммунологии» ФМБА России. Последующие главы содержат описание современных методов оценки мукозального иммунитета, фагоцитоза, клеточного, гуморального иммунитета и цитокинового звена, позволяющих диагностировать и устанавливать причины вторичной иммунологической недостаточности. Представлены нормативные параметры показателей иммунного статуса, клиническая значимость этих параметров и интерпретация их отклонений. Кроме того, в главах содержатся собственные данные авторов и данные об изменениях иммунитета под влиянием повреждающих факторов антропогенного происхождения, клинико-лабораторные примеры иммунодиагностики конкретных заболеваний.
Издание предназначено для врачей лечебно-профилактических и научно-исследовательских учреждений ФМБА России, а также для врачей различных специальностей, лаборантов, студентов медицинских вузов.

Иммунная система человека и высших животных формируется на основе генотипа, заложенного в гаметах, и факторов внешней среды. Эти факторы условно можно разделить на природные и антропогенные, которые могут оказывать как положительный, так и отрицательный эффект на иммунную систему. Так, длительное понижение температуры вызывает появление маркеров воспаления (СРБ, IL-6) у пожилых людей и повышает риск развития сердечно-сосудистых и легочных заболеваний (J. Halonen et al., 2010). В крупных городах и мегаполисах атмосферный воздух нельзя назвать природным или естественным. Он наполнен частицами выхлопных дизельных газов, углерода, кремния. В воздухе содержится повышенный уровень диоксида серы, диоксида азота, окиси углерода и др., что оказывает отрицательное влияние на здоровье человека, и особенно на развитие плода (T.J. Woodruff et al., 2009). Таких примеров можно привести много. Поэтому в конце XX в. возникло понятие «биобезопасность», т.е. предотвращение потери живыми существами своих биологических качеств и биологической целостности под влиянием ряда неблагоприятных факторов.

Развитие промышленности и процессы индустриализации существенно ухудшили экологическую обстановку. Возникли профессиональные болезни. В 1700 г. была написана Б. Рамаццини первая монография, посвященная медицине труда: «О болезнях ремесленников. Рассуждения». Стало очевидным, что многие профессии вызывают развитие определенных типов заболеваний. Возникновение в конце XIX — начале XX в. иммунологии как науки дало новый толчок к пониманию действия как природных, так и антропогенных факторов на здоровье человека. Дело заключается в том, что иммунная система в силу особенностей ее строения и функционирования значительно раньше других систем организма отвечает на различные воздействия. Поэтому иммунологические параметры стали своего рода индикаторами действия на здоровье человека факторов внешней среды. Стало ясно, что для решения проблемы биобезопасности и получения достоверной информации о влиянии этих факторов на иммунитет человека нужно иметь комплекс стандартных и унифицированных тестов оценки основных параметров иммунной системы. Стало также очевидным, что для получения достоверной информации о влиянии факторов внешней среды на иммунитет нужно создать методологию иммуноэпидемиологических исследований, охватывающих основные регионы страны. Для решения этих задач академиком Р.В. Петровым в 1984 г. была организована проблемная комиссия

АМН СССР (РАМН) «Эпидемиология иммунодефицитов и оценка иммунного статуса», действующая по настоящее время. По инициативе академиков Р.В. Петрова и Р.М. Хаитова в стране была создана иммунологическая служба, состоящая из сети центров и лабораторий клинической иммунологии. Результатом работы этой службы явилось создание иммунологической карты России, в которой представлены нормативные параметры основных компонентов иммунной системы и региональная иммунозависимая заболеваемость. В 1995 г. вышла первая по этой специальности монография Р.М. Хаитова с соавт. «Экологическая иммунология». В этой монографии представлена уникальная методология иммуноэпидемиологических исследований, центральным звеном которой является оценка иммунного статуса. Развитие теоретической и практической иммунологии, а также медицинской лабораторной техники позволило принципиально изменить технологию оценки иммунного статуса человека. Наличие в лаборатории клинической иммунологии таких приборов, как проточный лазерный цитометр, нефелометр, аппаратуры для полимеразной цепной реакции в реальном времени и др. позволяет быстро и качественно исследовать большие потоки населения и рабочих при иммуноэпидемиологических обследованиях. Проточный лазерный цитометр является многопрофильным прибором, с помощью которого можно исследовать не только количественные (процент и количество клеток иммунной системы), но и качественные параметры иммунитета (пролиферативный ответ, функциональную активность естественных киллеров, внеклеточные и внутриклеточные цитокины и пр.). Таким образом, с помощью современной технологии при иммуноэпидемиологических исследованиях можно выявлять нарушение функций клеток иммунной системы и выяснять конкретную причину развития иммунодефицитного состояния. Этот новый уровень развития экологической иммунологии авторы и постарались отразить в данной книге.

Содержание книги

«Оценка иммунного статуса человека в условиях воздействия химического и биологического фактора»

Иммунная система и факторы внешней среды

• Понятие об иммунном статусе человека
• Понятие об экологической иммунологии
• Методология экологической иммунологии
• Изменения иммунной системы под влиянием антропогенных факторов
• Диоксин как пример иммунотоксичных загрязнителей внешней среды
• Понятие об аларминах

Оценка мукозального иммунитета

• Получение и обработка секрета
• Оценка бактерицидной активности слюны человека с помощью лазерной проточной цитофлуорометрии
• Определение иммуноглобулинов А и G и секреторного иммуноглобулина A (IgA, IgG, s-IgA) в слюне человека
• Методика определения дефензинов в слюне человека
• Методика определения кателицидинов в слюне человека
• Количественное определение лактоферрина человека в слюне методом твердофазного иммуноферментного анализа
• Определение активности лизоцима на спектрофотометре
• Мукозальный иммунитет и стресс

Оценка функциональной активности фагоцитарной системы иммунитета

• Методы определения хемотаксиса лейкоцитов
• Определение фагоцитарного индекса лейкоцитов периферической крови по отношению к St. aureus
• Определение фагоцитарного числа лейкоцитов периферической крови по отношению к St. aureus
• Оценка бактерицидной функции фагоцитов периферической крови человека    
• Оценка киллерной активности макрофагов человека по отношению к М. bovis BCG «Paster», меченых 5-, 6-карбоксифлуоресцеиндиацетат-сукцинимидил эфиром (CFSE)
• Оценка продукции внутриклеточного кальция лейкоцитами периферической крови с помощью красителя Fluo-3
• Оценка продукции внутриклеточной перекиси водорода фагоцитарными клетками периферической крови с помощью красителя дихлорофлуоресцеиндиацетат
• Определение реорганизации актинового цитоскелета клетки с помощью ФИТЦ-меченого фаллоидина    
• Определение дегрануляции нейтрофилов
• Определение внутриклеточных а-дефензинов в нейтрофилах человека методом лазерной проточной цитометрии
• Оценка содержания миелопероксидазы в супернатантах нейтрофилов
• Оценка содержания лактоферрина в супернатантах нейтрофилов
• Определение функциональной активности нейтрофилов человека с помощью люминолзависимой хемилюминесценции
• Определение активных форм кислорода с помощью НСТ-теста
• Фагоцитоз и факторы внешней среды

Оценка гуморального иммунитета

• Методы количественного определения иммуноглобулинов
• Определение аллерген-специфических IgE-антител методом множественного аллерго-сорбентного теста (CLA MAST)
• Определение относительной аффинности IgG-антител к общей антигенной детерминанте бактерий
• Нормативные параметры иммуноглобулинов
• Экономические характеристики
• Гуморальный иммунитет и факторы внешней среды

Оценка субпопуляционного состава лимфоцитов

• Количественное определение популяций лимфоцитов с помощью проточной лазерной цитометрии
• Характеристика основных популяций и субпопуляций лимфоцитов
• Практическое применение оценки популяционного состава лимфоцитов

Оценка нарушений клеточного иммунитета

• Определение пролиферативной активности лимфоцитов под влиянием поликлональных активаторов
• Оценка дифференцировки лимфоцитов и функционирования их субпопуляций
• Определение антиген-специфических Т-лимфоцитов с использованием МНС-пептидных тетрамеров
• Методы оценки клеточной гибели в иммунологических исследованиях

Оценка цитокиновой сети

• Определение экспрессии цитокиновых генов
• Определение внутриклеточных цитокинов
• Определение секреции цитокинов методом иммуноферментных пятен - ELISPOT    
• Определение концентрации цитокинов в биологических жидкостях
• Биологическое тестирование цитокинов

Заключение

скачать книгу: «Оценка иммунного статуса человека в условиях воздействия химического и биологического фактора»